Как определяют группы крови с помощью цоликлонов, и насколько это достоверно?

Реакция со стандартными эритроцитами

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Международные шкалы

• Шкала ASA
• Шкала Маллампати
• Шкала Кормака
• Шкала Глазго
• Шкала Ричмонда
• Визуально-аналоговая шкала
• Числовая рейтинговая шкала

Методы определения

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Разведение производится так:

• В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
• Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.

Непосредственно исследование проводится таким образом:

• На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
• Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Видео: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

• Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы,
• Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй,
• При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III,
• Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками

Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами

Группы крови

0(I)	A(II)	B(III)	AB(IV)	0(I)	A(II)	B(III)
–	–	–	—	–	+	+	0(I)
+	–	+	—	–	–	+	A(II)
+	+	–	—	–	+	–	B(III)
+	+	+	–	–	–	–	AB(IV)

+ агглютинация,

– агглютинация отсутствует,

реакцию не проводят.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.

Цоликлоны

Вид цоликлонов

Группа крови

Результат агглютинации	Анти-А	Анти-В
—	—	0(I)
+	—	A(II)
—	+	B(III)
+	+	AB(IV)

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

• Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0,
• Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования,
• Стеклянные палочки для перемешивания образцов,
• Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

Оказание помощи врачу при наложении лейкопластырного скелетного вытяжения и вытяжения с помощью петли Глиссона

1. Уложить пациента на горизонтальную поверхность кровати с системой блоков и грузом в изголовье

1. Закрепить петлю Глиссона на голове либо из лейкопластыря сформировать петлю в основании черепа так, чтобы она фиксировалась у основания черепа (под подбородком и под большими затылочными буграми)

1. Прикрепить груз весом 6 кг (вес груза зависит от вида повреждения и определяется врачом)

35. Применение эластичных бинтов и чулок на нижние конечности

Эластичный бинт

1. Накладывать утром для предупреждения кровенаполнения и растяжения вен
2. Придать ноге возвышенное положение под углом 45 град.
3. Первые туры сделать у основания пальцев
4. Далее по спирали бинтовать до паховой складки
5. Туры должны оказывать умеренное давление на мягкие ткани; не должны вызывать неприятные ощущения; пальцы на стопе должны быть розовыми

36. Применение съемного бандажа, корсета

1. Предназначением бандажа, корсета является фиксация части туловища в функциональном состоянии, предупреждение осложнений, связанных с анатомическими дефектами тела, приводящими в отсутствии бандажа или корсета к более грубым анатомическим и функциональным расстройствам

1. Бандаж (корсет) должен содержаться в чистоте

1. Пациент должен принять горизонтальное положение перед надеванием бандажа (корсета)

1. При надевании не защемлять кожу; не допускать болезненных ощущений

Пуговицы и петли должны располагаться на лицевой стороне бандажа; лямки не должны «впиваться» в мягкие ткани.

1. Пребывание в бандаже (корсете) не должно приводить к нарушениям дыхания и сердечной деятельности

Определение резус фактора экспресс методом с помощью стандартного универсального реагента без подогрева в пробирке

Для определения резус-фактора может быть использована свежая не свернувшаяся кровь, взятая из пальца непосредственно перед исследованием, или консервированная, без всякой предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.

Техника определения.

– 1мл стандартного универсального реагента (антирезусная сыворотка группы AB(IV)+33% раствор полиглюкина);

-1мл исследуемой крови(эритроцитов)

На дно пробирки внести 1 каплю стандартного универсального реагента и 1 каплю исследуемой крови (или эритроцитов).

Содержимое пробирки перемешать встряхиванием и затем медленно поворачивать, наклоняя пробирку почти до горизонтали таким образом, чтобы содержимое растекалось по её стенкам. после 3-минутного покачивания ,

для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавить 2-3мл физиологического раствора хлористого натрия и перемешать, не взбалтывая, путём 2-3-х кратного перевёртывания пробирки. Оценку производить визуально.

Оценка результата.

Резус-(+) -наличие агглютинации в виде крупных хлопьев из эритроцитов на фоне просветлённой жидкости .

Резус-(-) -отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная жидкость).

Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (цоликлон анти-d , анти-d супер).

Цоликлон анти-D супер выпускается во флаконах по 2,5 или 10 мл (1 мл содержит 10 доз). Срок хранения — 1 год в холодильнике при t 2~8 °С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение месяца в закрытом виде

Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку или планшет.

Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом.

Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 сек, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 сек.

Результаты реакции считывают через 3 мин.

Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 сек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Метод агглютинации на чашках Петри.

– исследуемые эритроциты;

-две серии стандартных сывороток антирезус всех групп системы АВО;

-контрольные образцы резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов:

-водяная баня с постоянной температурой 46-48 С°

-чашки Петри

Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате, отсутствие ее – об отрицательном. Для контроля в этом методе используют заведомо Rh-отрицательные и Rh-положительные эритроциты.

Метод агглютинации с 10% желатином:

Реакция конглютинации с желатиной обычно проводится в пробирках емкостью 8—10 мл. В штатив устанавливают 2 ряда пробирок для двух различных серий стандартной сыворотки. В контрольные пробирки каждого ряда вводят по 1 капле стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов, в остальные пары пробирок — исследуемые эритроциты. Исследование можно проводить как с отмытыми, так и с неотмытыми эритроцитами.

Затем в каждую пробирку добавляют по одной капле подогретой до разжижения желатины (10% раствор) и по одной капле стандартной сыворотки. Содержимое пробирок смешивают путем встряхивания и помещают в водяную баню при t° 46—48° на 5 мин., по истечении которых в каждую пробирку доливают 5—8 мл подогретого до t° 46—48° физиологического раствора NaCl и рассматривают на свет, определяя наличие или отсутствие агглютинации (рис. 2).

Метод агглютинации в солевой среде.

При исследовании сывороткой, содержащей полные антитела, применяют метод агглютинации в солевой среде в маленьких пробирках (высотой 2—2,5 см, диаметром 0,5 — 0,6 см).

В штатив устанавливают 2 ряда пробирок (по количеству исследуемых образцов и по 2 для контроля), в которые вводится по 2 капли стандартной сыворотки и по 1 капле 2% взвеси эритроцитов, предварительно дважды отмытых физиологическим раствором NaCl.

Содержимое пробирок встряхивают и помещают в термостат при t° 37° на 1 час.

О резус-принадлежности судят по форме осадка, который рассматривают через лупу с 5—7-кратным увеличением над источником света, закрытым матовым стеклом. Результаты учитывают в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации в исследуемых эритроцитах после проверки контрольных образцов.

studopedia.ru>

I. Реагенты для типирования крови по антигенам эритроцитов

№ п/п	Наименование	Цена за мл, руб.	Цена за фл., руб.*
1	Цоликлон анти-А (фл. по 10 мл)	5,30	53,00
2	Цоликлон анти-А (фл. по 5 мл)	6,00	30,00
3	Цоликлон анти-В (фл. по 10 мл)	5,30	53,00
4	Цоликлон анти-В (фл. по 5 мл)	6,00	30,00
5	Цоликлон анти-АВ (фл. по 10 мл)	8,60	86,00
6	Цоликлон анти-АВ (фл. по 5 мл)	9,60	48,00
7	Цоликлон анти-А1 (лектин) (фл. по 10 мл)	21,00	210,00
8	Цоликлон анти-А1 (лектин) (фл. по 5 мл)	22,40	112,00
9	Цоликлон анти-А слабый (фл. по 10 мл)	8,00	80,00
10	Цоликлон анти-А слабый (фл. по 5,0 мл)	8,25	41,25
11	Цоликлон анти-D IgМ (фл. по 10 мл)	10,50	105,00
12	Цоликлон анти-D IgМ (фл. по 5 мл)	11,00	55,00
13	Цоликлон анти-D IgG (фл. по 10 мл)	10,50	105,00
14	Цоликлон анти-D IgG (фл. по 5 мл)	11,50	57,50
15	Цоликлон анти-C (фл. по 10 мл)	20,50	205,00
16	Цоликлон анти-C (фл. по 5 мл)	22,50	112,50
17	Цоликлон анти-Е (фл. по 10 мл)	20,50	205,00
18	Цоликлон анти-Е (фл. по 5 мл)	22,50	112,50
19	Цоликлон анти-с (фл. по 10 мл)	50,00	500,00
20	Цоликлон анти-с (фл. по 5 мл)	53,00	265,00
21	Цоликлон анти-е (фл. по 10 мл)	50,00	500,00
22	Цоликлон анти-е (фл. по 5 мл)	53,00	265,00
23	Цоликлон анти-D микс (фл. по 10 мл)	22,00	220,00
24	Цоликлон анти-D микс (фл. по 5 мл)	23,10	115,50
25	Цоликлон анти-DС (фл. по 10 мл)	35,20	352,00
26	Цоликлон анти-DС (фл. по 5 мл)	37,20	186,00
27	Цоликлон анти-DЕ (фл. по 10 мл)	35,00	350,00
28	Цоликлон анти-DЕ (фл. по 5 мл)	37,20	186,00
29	Цоликлон анти-DСЕ (фл. по 10 мл)	46,50	462,00
30	Цоликлон анти-DСЕ (фл. по 5 мл)	48,50	242,50
31	Цоликлон анти-CW (фл. по 10 мл)	71,50	715,00
32	Цоликлон анти-CW (фл. по 5 мл)	72,60	363,00
33	Цоликлон анти-K (фл. по 10 мл)	23,00	230,00
34	Цоликлон анти-K (фл. по 5 мл)	24,00	120,00
35	Цоликлон анти-k (фл. по 5 мл)	По предварительному запросу
36	Цоликлон анти-k (фл. по 2 мл)	По предварительному запросу
37	Цоликлон анти-М (фл. по 5 мл)	По предварительному запросу
38	Цоликлон анти-М (фл. по 2 мл)	По предварительному запросу
39	Цоликлон анти-N (фл. по 5 мл)	По предварительному запросу
40	Цоликлон анти-N (фл. по 2 мл)	По предварительному запросу
41	Цоликлон анти-S (фл. по 5 мл)	700,00	3 500,00
42	Цоликлон анти-S (фл. по 2 мл)	750,00	1 500,00
43	Цоликлон анти-s (фл. по 5 мл)	3 800,00	19 000,00
44	Цоликлон анти-s (фл. по 2 мл)	3 850,00	7 700,00
45	Цоликлон анти-Jka (фл. по 5 мл)	1 150,00	5 750,00
46	Цоликлон анти-Jka (фл. по 2 мл)	1 190,00	2 380,00
47	Цоликлон анти-Jkb (фл. по 5 мл)	1 150,00	5 750,00
48	Цоликлон анти-Jkb (фл. по 2 мл)	1 190,00	2 380,00
49	Цоликлон анти-Fya (фл. по 5 мл)	1 250,00	6 250,00
50	Цоликлон анти-Fya (фл. по 2 мл)	1 270,00	2 540,00
51	Цоликлон анти-Fyb (фл. по 5 мл)	По предварительному заказу
52	Цоликлон анти-Fyb (фл. по 2 мл)	По предварительному заказу
53	Цоликлон анти-Lea (фл. по 5 мл)	1 200,00	6 000,00
54	Цоликлон анти-Lea (фл. по 2 мл)	1 240,00	2 480,00
55	Цоликлон анти-Leb (фл. по 5 мл)	1 500,00	7 500,00
56	Цоликлон анти-Leb (фл. по 2 мл)	1 600,00	3 200,00
57	Цоликлон анти-P1 (фл. по 5 мл)	880,00	4 400,00
58	Цоликлон анти-P1 (фл. по 2 мл)	900,00	1 800,00
59	Реагент АГС (фл. по 10 мл)	20,00	200,00
60	Реагент АГС (фл. по 5 мл)	22,00	110,00
61	Раствор полиглюкина 33 % (фл. по 10 мл)	15,00	150,00
62	Раствор полиглюкина 33 % (фл. по 5 мл)	16,00	80,00
63	Раствор Liss (фл. по 10 мл)	1,50	15,00

*Цена реагентов без учета расходов по доставке.

Алгоритм определения в планшете

1. Внесите в лунку планшета 50 – 100 мкл реагента.
2. Добавьте 50 мкл 5 % взвеси эритроцитов в растворе NaCl.
3. Перемешайте пипетированием.
4. Инкубируйте при температуре 18 – 25 °С один час.
5. Проведите визуальную оценку осадка эритроцитов на дне лунки. В случае положительного результата RhD-типирования агглютинаты с неровными четко очерченными краями равномерно выстилают дно. При отсутствии антигена D наблюдается осадок в виде точки.

отбор образца кровифенотипирование проб по наиболее клинически значимым антигенам эритроцитоввизуальная оценка при исследовании проб на наличие клинически значимых антигенов эритроцитов

Группа крови + Резус-фактор

Индивидуальный признак, определяется наличием на поверхности эритроцита определенных антигенов. Выделяют четыре группы крови: О (I), А(II), В (III) и АВ (IV).Резус-фактором (Rh) называют антиген D. Лиц, имеющих антиген D, относят к резус-положительным (Rh+), а не имеющих его – к резус-отрицательным (Rh-). Применяется при переливании крови и ее компонентов, а также в гинекологии и акушерстве при планировании и ведении беременности.

Группа крови – это наследуемый признак, остающийся неизменным на протяжении всей жизни. Он определяется по присутствию определенных антигенов (А, В и АВ) на поверхности эритроцитов или по их отсутствию (0). Основная система идентификации по системе АВ0 предполагает четыре группы крови:

• 0 – первая
• А – вторая
• В – третья
• АВ – четвертая

Резус-фактор (Rh) – это антиген D. Люди, у которых он есть, являются резус-положительными (Rh+), а остальные – резус-отрицательными (Rh-).

Также учеными установлено наличие так называемого ослабленного положительного резус-фактора. Таким людям переливают кровь с отрицательным Rh, но если они выступают в качестве доноров, то их рассматривают как резус-положительных.

Исследование, как правило, занимает один день. В результатах будет указанная группа крови и Rh. Если вы хотите сдать анализы, то обратитесь в «МобилМед». География обслуживания – Москва и ближнее Подмосковье. Цена исследования указана в прайс-листе. Записаться на сдачу биоматериала можно через сайт и по телефону.

Группа крови – это признак, который передается каждому человеку по наследству, и он остается неизменным. Определение крови происходит, исходя из присутствия в ней специфической комбинации антигенов А, В и АВ на поверхности красных кровяных телец – эритроцитов, или их отсутствия (О).

Основная система идентификации групп крови определяет 4 группы крови О (I), А(II), В (III) и АВ (IV). Врачами давно установлен тот факт, что исключительно обладатели 1 группы крови являются универсальными донорами для остальных групп, а обладатели 4 группы – универсальными реципиентами.

Что касается резус-фактора (Rh), то под этим названием подразумевают антиген D. При его наличии в крови пациент имеет положительный резус-фактор, при его отсутствии – отрицательный. Также существует понятие ослабленного положительного резус-фактора – таким пациентам разрешено переливание крови с отрицательным резус-фактором, но они могут выступать в качестве доноров только для людей с положительным Rh.

ГРУППЫ КРОВИ.

Многочисленными исследованиями было показано, что в крови могут находиться различные белки (агглютиногены и агглютинины), комбинацией (наличием или отсутствием) которых и образуются четыре группы крови. Каждой группе дано условное обозначение: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV). Установлено, что переливать можно только одногруппную кровь. В исключительных случаях, когда нет одногрупповой крови, а переливание жизненно необходимо, допустимо переливание иногруппной крови. В этих условиях кровь 0 (I) группы можно перелить боль­ным с любой группой крови, а больным, имеющим кровь AB (IV) группы, можно перелить донорскую кровь любой группы.

Поэто­му, прежде чем начинать переливание крови, необходимо точно установить группу крови больного и группу пере­ливаемой крови.

Алгоритм проведения исследования

Все в организме человека обусловлено выработкой различных веществ. Не исключением является и группа крови, тип которой зависит от антигенного состава эритроцитов.

Современная медицина быстро развивается, и определение группы крови уже давно не в новинку. Существует множество методов ее определения. Одним из наиболее широко распространенных является определение группы крови цоликлонами.

Что это такое?

Цоликлоном называют специальное антитело, реагирующее с антигенами, расположенными на поверхности мембран эритроцитов. Для их получения используют методы генной инженерии – вначале получают специальные бактерии, которые вводят в организм мышей. После иммунизации организма мыши получают ее асцитную жидкость, из которой впоследствии и выделяют необходимые антитела.

Они представляют собой иммуноглобулины класса М.

Благодаря особой технологии изготовления, цоликлоны безопасны для человека в эпидемиологическом плане.

Вещество выпускается в виде водно-солевого раствора, который добавляют к имеющимся образцам крови. Для каждой группы антигенов имеется собственный раствор цоликлона – анти-А цоликлон имеет розовую окраску, анти-В – голубую, а цоликлон анти-D бесцветен.

Свое название препараты получили от названия места, где они были созданы – Центральный ордена Ленина институт переливания крови в Москве.

Методика определения

Определение группы крови цоликлонами может проводиться в нативной крови с добавлением консерванта или без него, а также при исследовании капиллярной крови, взятой из пальца. Непосредственно определение группы проводится на специальной пластине или планшете.

В первую очередь, на планшет наносится капля раствора цоликлона под соответствующей пометкой. Рядом с раствором цоликлона наносится капля исследуемой крови, и они смешиваются между собой.

Определение группы крови цоликлонами проводится при равномерном покачивании пластины из стороны в сторону. Визуально, наблюдается агглютинация эритроцитов (слипание их между собой).

Если результат отрицательный, агглютинации не происходит.

В некоторых учреждениях с целью контроля за препаратами обязательно следует зафиксировать время открытия средства и срок его годности. Рекомендуется документально отразить срок годности реагента, если проводится определение группы крови цоликлонами. Фото используемых флаконов делают редко, однако подобная фиксация также возможна.

Интерпретация результатов

После проведения теста уже можно узнать, какая же группа крови у пациента.

Каковы же результаты исследования, если проводилось определение группы крови цоликлонами? Таблица сопоставления цоликлона и группы крови позволяет разобраться в полученных результатах.

Определение резус-фактора

• На поверхность планшета наносится приблизительно 0,1 мл реагента.
• Рядом капают 0,01 исследуемой крови.
• Цоликлон и изучаемую жидкость смешивают специальной стеклянной палочкой, каждые полминуты планшет необходимо покачивать.

Важно! Возникновение агглютинации отмечается спустя 15 секунд после перемешивания, ярко заметный эффект наступает через 60 секунд, однако результат, который допустимо считать достоверным, наблюдается только через 3 минуты. В течение всего времени планшет нужно покачивать.. При склеивании и выпадении осадка из эритроцитов кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации резус-фактор получает отрицательную отметку

Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования

При склеивании и выпадении осадка из эритроцитов кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации резус-фактор получает отрицательную отметку. Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования.

Нюансы процедуры

Точность исследования ГК и резус-фактора с помощью цоликлонов очень высока, однако порой анализ выдает неправильные результаты: причиной является фактор человеческой ошибки, когда процедуру проводят с нарушениями.

Чтобы снизить риск такой ошибки, нужно помнить о следующих аспектах:

Цоликлоны хранятся в холодильнике, оптимальный температурный режим – +2… +8 градусов по Цельсию. Если флакон распечатан, его содержимое нужно использовать в течение 30 дней, крышка должна быть плотно завинчена. Реагенты очень чувствительны к внешним воздействиям и при несоблюдении правил хранения или по истечении срока теряют свои качества, что приводит к ошибкам. Исследование проводится при ярком освещении, оптимальный режим в лаборатории – +15… +25 градусов по Цельсию

Если климатические условия не дают возможности соблюсти нужную температуру воздуха, поверхность планшета перед процедурой охлаждают

Важно не спутать, какие цоликлоны где находятся на планшете, для этой цели их местоположение обозначается на поверхности маркером. Хотя реагенты анти-А и анти-B имеют цветовое различие, после добавления крови оно практически исчезает

Следует соблюдать пропорции жидкостей: если эритроцитов будет слишком много, реакцию агглютинации будет сложнее отследить, в противоположном случае (слишком малый объем) склеивание происходит в замедлении. Нельзя допустить, чтобы две капли соединились: даже касание краями приводит к искажению результатов анализа. Если жидкости все же слились, исследование с помощью цоликлонов проводят сначала. При смешении при помощи лабораторной стеклянной палочки необходимо брать отдельный предмет для каждой изучаемой капли. Минимальная продолжительность наблюдения – 3 минуты, при неоднозначных результатах исследование длится до 5 минут.

Если жидкости все же слились, исследование с помощью цоликлонов проводят сначала. При смешении при помощи лабораторной стеклянной палочки необходимо брать отдельный предмет для каждой изучаемой капли. Минимальная продолжительность наблюдения – 3 минуты, при неоднозначных результатах исследование длится до 5 минут.

В ходе процедуры можно отметить и реакции, способные ввести в заблуждение: например, замедленное склеивание происходит при воздействии второго реагента. Когда реакция затягивается, со временем жидкость подсыхает, что сопровождается естественным выпадением эритроцитов в осадок, поэтому этот результат не считается достоверным.

Также в ряде случаев отмечается оседание кровяных телец по краям: неопытные специалисты принимают эффект за склеивание, но в действительности это случается, если планшет оставили в неподвижном состоянии, наблюдая за реакцией. Только если поверхность слегка раскачивали, результат можно считать правильным.

Также определить группу может быть сложно, если пациент страдает от одной из болезней, изменяющих свойства кровяных телец. К таким заболеваниям относят проблемы печени, селезенки, пневмонию, ожоги различной степени, сепсис. Наличие таких болезней сильно обостряет способность эритроцитов выпадать в осадок, и панагглютинация наблюдается даже при воздействии физраствора.

Справочно. Панагглютинация представляет собой искажение процесса склеивания (агглютинации). Изменение белкового состава сыворотки крови может привести к склеиванию всех со всеми.

С другой стороны, цоликлоны не вызовут агглютинацию, если пациент страдает лейкозом: при этой болезни кровяные тельца не реагируют даже на высокоактивные раздражители, такое же явление характерно для младенцев.

Важно. У близнецов и людей, перенесших операцию по пересадке костного мозга или частые переливания жидкости иной группы, может появиться кровяная химера, при которой в кровеносной системе уживаются эритроциты различных типов

В этом случае анализ особенно труден, для максимально точного определения химического состава требуется провести дополнительные лабораторные исследования с использованием специального оборудования и других способов

В этом случае анализ особенно труден, для максимально точного определения химического состава требуется провести дополнительные лабораторные исследования с использованием специального оборудования и других способов.